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Introducción
El
25% de las prescripciones médicas en los países industrializados
corresponde a plantas medicinales (Farnsworth y Morris,
1976; Akerete, 1984), mientras que en los países en desarrollo
esta cifra llega al 80%.
Las
plantas medicinales son un verdadero arsenal terapéutico
al ser utilizadas como materia prima para la producción
de extractos, para el aislamiento de sustancias naturales
puras o en extractos purificados y estandarizados que permiten
una mejor caracterización analítica y presentan mejores
requisitos de Calidad, Seguridad y Eficacia exigidos para
cualquier medicamento moderno, sea natural o sintético (Sharapin,
2000). Uno de los factores de fundamental importancia en
la industrialización de fármacos de origen vegetal es la
Calidad de la materia prima.
La
composición química de una planta medicinal varía de acuerdo
a la forma y tiempo de la colecta, a las condiciones climáticas,
al suelo y a las distintas técnicas de cultivo. Cuando se
trabaja con material colectado de fuente natural, se presentan
grandes variabilidades en cuanto al tenor de principios
activos, existen posibilidades de falsificaciones y mezclas,
y destrucción innecesaria de plantas con el riesgo de ocasionar
la extinción de muchas especies.
La
colecta de plantas nativas puede ser justificada cuando
se trata de especies de domesticación difícil, crecimiento
lento o reducida demanda en el mercado (Harnischfeger, 1977),
en caso contrario se deben obtener mediante un cultivo racional.
El
establecimiento de un cultivo de plantas medicinales se
recomienda cuando:
-
Hay pocas plantas nativas Las plantas nativas tienen una
distribución muy espaciada
- Las
plantas se hallan en zonas inaccesibles (regiones montañosas
y accidentadas, árboles muy altos, etc.)
- Una
especie o sus variedades tienen un tenor mayor de principios
activos
- Del
cultivo resulta una mayor productividad del tenor de sus
constituyentes por la introducción de buenas prácticas de
agricultura, mejores condiciones de suelo y control de plagas
- El
cultivo hace más rápida la colecta Hay grandes demandas
del mercado
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Foto
1: Planta de P. caerulea in vitro |
Foto
2: Plantas de P. caerulea obtenidas
in vitro y cultivadas a campo |
Objetivo
del proyecto
Establecer
una calidad óptima de las especies medicinales nativas,
a través de la domesticación, para proporcionar un estricto
control de las plantas medicinales logradas a través de
la técnica del cultivo in vitro y preservar la biodiversidad.
Metodología
Las
experiencias se realizan en las Facultades de Ciencias Bioquímicas
y Farmacéuticas (cátedra de Botánica) y de Ciencias Agrarias
(cátedras de Biología, de Fisiología Vegetal y de Estadística).
Especies
nativas seleccionadas
-
Baccharis spp. ("carquejas"): ampliamente
empleadas como antiespasmódicas, digestivas y estomática
.
- Passiflora caerulea L. y Passiflora alata
Curtis ("pasionaria"): las partes aéreas son utilizadas
como sedante, ansiolítica y antiespasmódica en la medicina
popular.
- Achyrocline satureioides DC ("marcela"):
la materia médica la constituyen los capítulos, es muy utilizada
como digestiva, antiespasmódica, espectorante y en afecciones
de las vías respiratorias.
- Aloysia citriodora Palau ("cedrón"):
las hojas son empleadas como digestivas, estomáticas y sedantes
suaves. Es una de las especies más sobreexplotadas en nuestro
país y cuando escasea se la sustituye para su comercialización
por Cyngopogon citratus ("cedrón paraguayo").
Cultivo
in vitro
Se
aplican los pasos tradicionales del cultivo de tejidos vegetales:
establecimiento de un cultivo aséptico, micropropagación,
pasaje a tierra y aclimatación.
Estudios
histológicos
Se
toman los distintos explantos a determinados días de cultivo
in vitro, se fijan y se aplica la técnica convencional
de inclusión en parafina, corte, coloración y finalmente
se estudian los cambios histológicos que se han producido.
Cultivo
a campo
Se
realiza la implantación de las plantas logradas por cultivo
in vitro en parcelas a campo, adecuando las parcelas
y los sistemas de conducción de acuerdo a las características
botánicas y a los hábitos de crecimiento de cada especie.
Estudios
químicos
Para
el estudio químico de P. caerulea, se realizan extracciones
de los principios activos tanto de las plantas obtenidas
por micropropagación como de las silvestres y se aplican
técnicas cromatográficas.
Resultados
obtenidos
En
una primera etapa, se logró la obtención de las plantas
madres a partir de la germinación de semillas P. caerulea
en condiciones de asepsia. Se extrajeron trozos de hojas
y cotiledones y se obtuvo regeneración de plantas, las que
se aclimataron en condiciones de invernadero y posteriormente
se transplantaron a campo con un sistema de conducción en
espalderas por tratarse de una planta trepadora. Por medio
de estudios histológicos se comprobó que los brotes se originaron
por organogénesis directa sin pasaje por etapa de callo.
De los estudios químicos se dedujo que no existen diferencias
significativas en los metabolitos secundarios presentes
en la planta madre y en las obtenidas por cultivo de tejidos.
Se están realizando cromatografías por HPLC, para identificar
dichos principios activos (Gattuso et al., 2003; Severin
et al., 2003 a, b).
En
este momento se están utilizando como explantos hojas y
nudos de P. alata, los que han mostrado buena respuesta
a la formación de vástagos y raíces. Se siguen probando
condiciones de cultivo para optimizar la regeneración en
esta especie y químicamente se están ensayando las extracciones
y las distintas fases móviles que permitirán realizar un
"finger print" de los metabolitos secundarios
presentes tanto en la planta madre como en las plantas provenientes
de cultivo de tejidos.
En
el caso de Aloysia citriodora, los explantos que
mejores resultados han brindado han sido los nudos, una
vez obtenidas las plantas in vitro, se destilarán
sus aceites esenciales y se realizará cromatografía gaseosa.,
utilizando distintos marcadores químicos.
Las
semillas de Achyrocline satureioides se colocaron
a germinar en un medio aséptico para después trabajar con
plantas madres obtenidas de esta forma.
En
el género Baccharis, se trabajó con dos de las especies
reconocidas por Farmacopea Nacional Argentina VI Ed. (1978),
como medicinales, B. articulata y B. trimera,
para ambas se emplearon trozos de tallos alados y yemas
terminales. Hasta el momento no se ha logrado éxito por
problemas de contaminación de los explantos.
Referencias
bibliográficas
-
Akerete,
O. 1984. WHO´s Traditional Medicine Programme: progress
and perspectives. WHO Chron, 38: 78-81.
-
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Buenos Aires.
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-
Gattuso, S.; Severin, C.; Salinas, A.; Gattuso, M.; Giubileo,
G.; Aguirre, A.; Busilacchi, H. 2003. Micropropagation of
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Harnischfeger, G. 1997. Industrialization of Medicinal Plants.
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-
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en Centroamérica. Turrialba, CATIE. 132 p.
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H.; Giubileo, G. y Aguirre, A. 2003a In vitro seed germination
of Passiflora caerulea. Journal of Tropical Medicinal Plants
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-
Severin, C.; Salinas, A.; Gattuso, S.; Gattuso, M.; Busilachi,
H.; Giubileo, G.; Aguirre, A. 2003b Micropropagación de
Passiflora caerulea L., una especie medicinal nativa. Seed
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-
Sharapin, N. 2000. Qualidade da materia-prima para produtos
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de RIPROFITO (Red Iberoamericana de Productos Fitofarmacéuticos).
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-
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L. (eds.). CIAT (Centro Internacional de Agricultura Tropical).
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